你可知內(nèi)切酶分為哪幾種類型呢?
發(fā)布日期:2021-09-24 瀏覽次數(shù):2519
內(nèi)切酶,即限制性核酸內(nèi)切酶。亦稱限制性核酸酶。它是一種能催化多核苷酸的鏈斷裂的酶,只對(duì)脫氧核糖核酸內(nèi)一定堿基序列中某特一定位置發(fā)生作用,把這位置的鏈切開(kāi)。通過(guò)內(nèi)切酶可以把某一個(gè)遺傳基因切下來(lái),若再連在別的細(xì)胞的遺傳基因上,便可使這細(xì)胞具有新的遺傳特性。內(nèi)切酶的發(fā)現(xiàn)和采用,使基因工程成為可能。
第一類內(nèi)切酶能識(shí)別專一的核苷酸順序,并在識(shí)別點(diǎn)附近的一些核苷酸上切割DNA分子中的雙鏈,但是切割的核苷酸順序沒(méi)有專一性,是隨機(jī)的。這類限制性內(nèi)切酶在DNA重組技術(shù)或基因工程中沒(méi)有多大用處,無(wú)法用于分析DNA結(jié)構(gòu)或克隆基因。這類酶如EcoB、EcoK等。
第二類內(nèi)切酶能識(shí)別專一的核苷酸順序,并在該順序內(nèi)的固定位置上切割雙鏈。由于這類限制性內(nèi)切酶的識(shí)別和切割的核苷酸都是專一的。所以總能得到同樣核苷酸順序的DNA片段,并能構(gòu)建來(lái)自不同基因組的DNA片段,形成雜合DNA分子。因此,這種限制性內(nèi)切酶是DNA重組技術(shù)中常用的工具酶之一。這種酶識(shí)別的專一核苷酸順序最常見(jiàn)的是4個(gè)或6個(gè)核苷酸,少數(shù)也有識(shí)別5個(gè)核苷酸以及7個(gè)、9個(gè)、10個(gè)和11個(gè)核苷酸的。如果識(shí)別位置在DNA分子中分布是隨機(jī)的,則識(shí)別4個(gè)核苷酸的限制性內(nèi)切酶每隔46(4096)個(gè)核苷酸就有一個(gè)切點(diǎn)。人的單倍體基因組據(jù)估計(jì)為3×199核苷酸,識(shí)別4個(gè)核苷酸的限制性內(nèi)切酶的切點(diǎn)將有(3×109/2.5×102)約107個(gè)切點(diǎn),也就是可被這種酶切成107片段,識(shí)別6個(gè)核苷酸的限制性內(nèi)切酶也將有(3×109/4×103)約106個(gè)切點(diǎn)。